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结核分枝杆菌恒温检测技术 来源: 时间:2017-02-16 15:28:51 浏览次数:     结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculsis,MTB)感染引发的全身多系统疾病,是严重危害人类健康的全球性传染病之一。目前,全球大约有1/3的人感染MTB,其中5~10%的感染者最终发展成为结核病患者。我国是全球结核病流行严重的22个国家之一。因此,早期准确诊断是结核病 (TB) 患者得以及时治疗的关键,而提高诊断技术对早期发现结核病患者至关重要。
    传统的结核病诊断方法包括活检组织病理抗酸染色和结核分枝杆菌培养。活检病理抗酸染敏感性不高,容易出现假阴性,且不能区别结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌。结核分枝杆菌培养阳性可明确诊断结核及菌型,但培养时间长,且阳性率较低。近年来,结核病分子诊断技术呈迅速发展态势,其中结核分枝杆菌恒温扩增检测技术具有高特异性和灵敏度、操作简便、检测时间短等特点而备受关注。
    结核分枝杆菌恒温扩增检测技术包括RNA恒温扩增实时检测技术(SAT)、环介导等温扩增检测法(LAMP)以及交叉引物扩增技术(CPA)。SAT技术是国内自主专利技术,是基于RNA恒温扩增的一项核酸扩增技术,其检测结果可作为鉴别菌是否处于活动期的依据,更利于用药之后疗效的监测,以及对是否治愈进行判断。LAMP技术可直接扩增临床标本中结核分枝杆菌DNA,是一种基于链置换酶扩增的新型的DNA恒温扩增技术,其检测结果肉眼即可观察,整个过程约需大约1小时。CPA技术是由恒温扩增技术演变而来的,针对靶序列设计多重交联引物,包括交叉引物,置换引物和延伸引物。反应由链置换型DNA聚合酶催化,于恒温条件下,在密闭的具有防污染核酸试纸条检测装置中完成。
    分子生物学技术是快速有效的检测方法,具有很高的灵敏度和特异性,对结核病的临床诊断上具有良好的应用前景。总之,随着结核病诊断技术研究的不断深入,对于引导临床规范用药以及减少结核病的传播有着深远意义。
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